<var id="v7zzb"><em id="v7zzb"><meter id="v7zzb"></meter></em></var>

      <menuitem id="v7zzb"><span id="v7zzb"><thead id="v7zzb"></thead></span></menuitem>

        <font id="v7zzb"></font>
          <font id="v7zzb"></font>

              歡迎訪問上海美析儀器有限公司網站!

              當前位置:首頁  >  技術文章  >  核酸的定量是分光光度計使用頻率很高的功能

              核酸的定量是分光光度計使用頻率很高的功能

              發布時間:2022-03-14      點擊次數:122
                核酸的定量是分光光度計使用頻率很高的功能??梢远咳苡诰彌_液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA。
               
                核酸的高吸收峰的吸收波長260 nm。每種核酸的分子構成不一,因此其換算系數不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應的系數。如:1OD 的吸光值分別相當于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。
               
                測試后的吸光值經過上述系數的換算,從而得出相應的樣品濃度。測試前,選擇正確的程序,輸入原液和稀釋液的體積,爾后測試空白液和樣品液。然而,實驗并非一帆風順。讀數不穩定可能是實驗者最頭痛的問題。靈敏度越高的儀器,表現出的吸光值漂移越大。
               
                事實上,分光光度計的設計原理和工作原理,允許吸光值在一定范圍內變化,即儀器有一定的準確度和精確度。
               
                如Eppendorf Biophotometer的準確度≤1.0%(1A)。這樣多次測試的結果在均值1.0%左右之間變動,都是正常的。
               
                另外,還需考慮核酸本身物化性質和溶解核酸的緩沖液的pH值,離子濃度等:在測試時,離子濃度太高,也會導致讀數漂移如TE,可大大穩定讀數。
               
                樣品的稀釋濃度同樣是不可忽視的因素:由于樣品中不可避免存在一些細小的顆粒,尤其是核酸樣品。這些小顆粒的存在干擾測試效果。為了大程度減少顆粒對測試結果的影響,要求核酸吸光值至少大于0.1A,吸光值在0.1-1.5A。
               
                在此范圍內混合液不能存在氣泡,空白液無懸浮物,否則讀數漂移劇烈;必須使用相同的比色杯測試空白液和樣品,否則濃度差異太大;
               
                換算系數和樣品濃度單位選擇一致;不能采用窗口磨損的比色杯;樣品的體積必須達到比色杯要求的小體積等多個操作事項。
               
                除了核酸濃度,分光光度計同時顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度,如A260/A280的比值,用于評估樣品的純度,因為蛋白的吸收峰是280nm。純凈的樣品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。
               
                如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白質或者酚類物質的影響。A230表示樣品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽等,較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。A320檢測溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品,A320一般是0。
              版權所有©2022 上海美析儀器有限公司 All Rights Reserved     備案號:滬ICP備13043738號-4     sitemap.xml     管理登陸     技術支持:化工儀器網
              欧美性爱天天射恬和院_欧美性爱偷拍视频网站_欧美性爱图口交图_欧美性爱图片视频网_欧美性爱图一区二区三区